Electroforeza: ce este, la ce servește și cum se face

Conţinut

• Pentru ce este
• Cum se face
• Tipuri de electroforeză
• 1. Electroforeza hemoglobinei
• 2. Electroforeza proteinelor

Electroforeza este o tehnică de laborator efectuată cu scopul de a separa moleculele în funcție de mărimea și sarcina electrică a acestora, astfel încât să poată fi pus diagnosticul bolilor, să se poată verifica expresia proteinelor sau să se identifice microorganismele.

Electroforeza este o procedură simplă și ieftină, fiind utilizată în rutina de laborator și în proiecte de cercetare. Conform scopului electroforezei, poate fi necesară efectuarea altor teste și examene pentru a ajunge la un diagnostic, de exemplu.

Pentru ce este

Electroforeza poate fi realizată în diferite scopuri, atât în ​​cadrul proiectelor de cercetare, cât și în diagnosticare, deoarece este o tehnică simplă și cu costuri reduse.Astfel, electroforeza poate fi efectuată pentru:

• Identificați viruși, ciuperci, bacterii și paraziți, această aplicație fiind mai frecventă în proiectele de cercetare;
• Test de paternitate;
• Verificați expresia proteinelor;
• Identificați mutațiile, fiind utile în diagnosticul leucemiei, de exemplu;
• Analizați tipurile de hemoglobină circulantă, fiind util în diagnosticul anemiei falciforme;
• Evaluează cantitatea de proteine ​​prezente în sânge.

Conform scopului electroforezei, poate fi necesară efectuarea altor teste complementare pentru ca medicul să poată finaliza diagnosticul.

Cum se face

Pentru a efectua electroforeza, este necesar gelul, care poate fi poliacrilamidă sau agaroză în funcție de scop, tampon de electroforeză și cuvă, marker de greutate moleculară și un colorant fluorescent, pe lângă un echipament de lumină UV sau LED, cunoscut și sub numele de transiluminator.

După pregătirea gelului, trebuie așezat un obiect specific, astfel încât puțurile să fie făcute în gel, denumit popular pieptene, și lăsați gelul să se stabilească. Când gelul este gata, aplicați substanțele pe godeuri. Pentru aceasta, un marker de greutate moleculară trebuie plasat într-unul din puțuri, un control pozitiv, care este substanța care se știe ce este, un control negativ, care garantează validitatea reacției și probele care urmează să fie analizate. Toate probele trebuie amestecate cu un colorant fluorescent, deoarece astfel este posibilă vizualizarea benzilor de pe transiluminator.

Gelul cu probele trebuie plasat în cuva de electroforeză, care conține soluția tampon specifică, apoi dispozitivul este pornit astfel încât să existe curent electric și, în consecință, diferența de potențial, care este importantă pentru particulele de separare în funcție de sarcină și dimensiune. Timpul de funcționare electroforetic variază în funcție de obiectivul procedurii și poate dura până la 1 oră.

După timpul specificat, este posibil să vizualizați rezultatul cursei electroforetice prin transiluminator. Când gelul este plasat sub lumină UV sau LED, este posibil să se vizualizeze modelul de bandă: cu cât este mai mare molecula, cu atât este mai mică migrarea acesteia, apropiindu-se de fântână, în timp ce cu cât molecula este mai ușoară, cu atât este mai mare potențialul migrator.

Pentru ca reacția să fie validată, benzile controlului pozitiv trebuie vizualizate și nimic nu trebuie vizualizat în controlul negativ, deoarece altfel este o indicație că a existat contaminare și întregul proces trebuie repetat.

Tipuri de electroforeză

Electroforeza poate fi efectuată în diferite scopuri și, în funcție de scopul său, pot fi utilizate mai multe tipuri de gel, cele mai frecvente fiind poliacrilamida și agaroză.

Electroforeza pentru identificarea microorganismelor este mai frecventă în laboratoarele de cercetare, cu toate acestea, în scopuri de diagnostic, electroforeza poate fi utilizată pentru a identifica bolile hematologice și bolile care evoluează odată cu creșterea cantității de proteine, fiind principalele tipuri de electroforeză:

1. Electroforeza hemoglobinei

Electroforeza hemoglobinei este o tehnică de laborator efectuată pentru identificarea diferitelor tipuri de hemoglobină care circulă în sânge, făcând posibilă identificarea prezenței bolilor legate de sinteza hemoglobinei. Tipul de hemoglobină este identificat prin intermediul electroforezei la un pH specific, ideal între 8,0 și 9,0, cu un model de benzi care poate fi comparat cu modelul normal, permițând identificarea hemoglobinelor anormale.

Pentru ce este făcut: Electroforeza hemoglobinei este efectuată pentru a investiga și diagnostica bolile legate de sinteza hemoglobinei, cum ar fi anemia falciformă și boala hemoglobinei C, pe lângă faptul că este utilă în diferențierea talasemiei. Aflați cum să interpretați electroforeza hemoglobinei.

2. Electroforeza proteinelor

Electroforeza proteinelor este un examen solicitat de medic pentru a evalua cantitatea de proteine ​​care circulă în sânge și, astfel, pentru a identifica bolile. Această examinare se face dintr-o probă de sânge, care este centrifugată pentru a obține plasma, partea din sânge constând, printre alte substanțe, din proteine.

După electroforeză, se poate vizualiza un model de benzi și, ulterior, un grafic în care este indicată cantitatea fiecărei fracții de proteine, fiind fundamentală pentru diagnostic.

Pentru ce este făcut: Electroforeza proteinelor permite medicului să investigheze apariția mielomului multiplu, deshidratare, ciroză, inflamație, boli hepatice, pancreatită, lupus și hipertensiune arterială în conformitate cu modelul benzii și graficul prezentat în raportul de examinare.

Înțelegeți cum se face și cum să înțelegeți rezultatul electroforezei proteinelor.