Pata Gram: cum este făcută și la ce servește

Conţinut

• Cum se face pata de Gram
• Pentru ce este

Pata de Gram, sau pur și simplu Gram, este o tehnică simplă și rapidă care urmărește diferențierea bacteriilor în funcție de caracteristicile peretelui lor celular după expunerea la diferiți coloranți și soluții.

Astfel, prin colorarea Gram, este posibil să se verifice, pe lângă forma bacteriilor, culoarea pe care o dobândesc, iar acest rezultat este important pentru definirea altor strategii de identificare a speciilor bacteriene și pentru ca medicul să indice un tratament preventiv conform caracteristicilor observate microscopic.

Colorarea Gram se face de obicei în mod obișnuit în laborator și face parte din examenul de bacterioscopie. Înțelegeți ce este bacterioscopia și cum se face.

Cum se face pata de Gram

Pata Gram este o metodă rapidă, practică și ieftină pentru identificarea bacteriilor responsabile de infecții, fiind utilă medicilor pentru a indica un tratament preventiv pentru infecția care poate apărea, deoarece sunt cunoscute caracteristicile specifice ale acestor grupuri de bacterii,

Colorarea Gram se face în 7 pași principali, cu toate acestea protocolul poate varia în funcție de laborator:

1. Așezați câteva colonii ale bacteriei pe lamelă, adăugând o picătură de apă pentru a facilita omogenizarea coloniilor;
2. Lăsați-l să se usuce puțin, iar lama poate trece rapid prin flacără pentru a favoriza uscarea, totuși este important să acordați atenție temperaturii, deoarece dacă temperatura este prea ridicată este posibil să existe o schimbare în structura bacterii, care pot interfera cu rezultatul examenului;
3. Când diapozitivul este uscat, acoperiți cu vopseaua de cristal violet și lăsați-l să acționeze timp de aproximativ 1 minut;
4. Spălați diapozitivul cu un jet de apă curentă și acoperiți diapozitivul cu lugol, care are ca obiectiv fixarea colorantului albastru și lăsați-l să acționeze 1 minut. Ambele tipuri de bacterii pot absorbi complexul format de colorant și lugol, devenind albastru;
5. Apoi, spălați diapozitivul cu apă curentă și aplicați 95% alcool, lăsând-o să acționeze 30 de secunde. Alcoolul este responsabil pentru dizolvarea membranei lipidice care formează bacterii gram-negative și, astfel, îndepărtează complexul format între colorant și lugol, decolorând aceste bacterii. Cu toate acestea, în cazul bacteriilor gram-pozitive, alcoolul deshidratează peretele celular al bacteriilor gram-pozitive, determinând contracția porilor și făcându-le impermeabile;
6. Apoi, spălați-vă din nou în apă curentă și acoperiți diapozitivul cu al doilea colorant, fucsină sau safranină și lăsați-l să acționeze timp de 30 de secunde;
7. Apoi, spălați diapozitivul sub apă curentă și lăsați-l să se usuce la temperatura camerei.

De îndată ce lamela este uscată, este posibil să punem o picătură de ulei de imersie și să observăm lamela la microscop cu un obiectiv 100x, fiind posibil să verificăm prezența sau absența bacteriilor, precum și prezența drojdiilor și a epiteliului. celule.

Pentru ce este

Colorarea Gram are ca principal obiectiv diferențierea bacteriilor în funcție de caracteristicile peretelui celular și de morfologia generală. Astfel, conform caracteristicilor observate la microscop, bacteriile pot fi clasificate în:

• Bacterii gram-pozitive, care sunt vizualizate cu o culoare albastră datorită faptului că nu sunt decolorate de alcool, deoarece au un perete celular mai gros și porii lor se restrâng atunci când sunt expuși la lugol;
• Bacterii gram-negative, care sunt vizualizate cu o culoare roz / violet datorită faptului că sunt decolorate de alcool și colorate de safranină sau fucsină.

După vizionarea bacteriilor la microscop, este posibil să se efectueze teste suplimentare în laborator pentru a identifica speciile de bacterii. Cu toate acestea, prin Gram și asocierea cu semne și simptome prezentate de persoană, medicul poate indica un tratament preventiv până când este disponibil rezultatul unor examene mai specifice, întrucât în ​​acest fel este posibilă scăderea ratei de replicare bacteriană și prevenirea complicațiilor.